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夜间行驶电动车追尾自行车，一般而言电动车一方需承担主要或全部责任，但具体责任划分要依据实际情况确定。
在交通事故责任认定中，通常依据当事人的行为对发生道路交通事故所起的作用以及过错的严重程度来划分。电动车追尾自行车的情况较为常见，按照常规的交通规则和责任判定原则，后车应当与前车保持足以采取紧急制动措施的安全距离。在夜间行驶时，由于光线较暗，更需要电动车驾驶者提高注意力，确保安全车距。所以多数情况下，电动车追尾自行车，电动车驾驶者因未保持安全距离，存在过错，会被认定承担主要责任或全部责任。
不过，也存在一些特殊情况。如果自行车存在违反交通规则的行为，如突然改变行驶方向、在非机动车道逆行、骑行中做出大幅度晃动等危险动作，且这些行为与追尾事故的发生有直接关联，那么自行车一方也需要承担一定责任。例如，自行车在没有观察后方来车的情况下突然转弯，导致电动车来不及刹车而追尾，自行车驾驶者的违规行为就是事故发生的重要因素，此时自行车驾驶者可能要承担部分责任。
还需要考虑事故发生地的具体路况。如果道路照明条件极差，或者存在道路施工、障碍物等影响视线和通行的情况，也可能会对责任划分产生影响。
一旦发生此类交通事故，当事人应及时报警，由交警进行现场勘查和调查取证。交警会根据事故现场的具体情况，包括车辆行驶轨迹、刹车痕迹、当事人陈述等多方面因素，依据相关交通法规作出准确的责任认定。
法律依据：
《道路交通事故处理程序规定》 第六十条
公安机关交通管理部门应当根据当事人的行为对发生道路交通事故所起的作用以及过错的严重程度，确定当事人的责任。
（一）因一方当事人的过错导致道路交通事故的，承担全部责任；
（二）因两方或者两方以上当事人的过错发生道路交通事故的，根据其行为对事故发生的作用以及过错的严重程度，分别承担主要责任、同等责任和次要责任；
（三）各方均无导致道路交通事故的过错，属于交通意外事故的，各方均无责任。
一方当事人故意造成道路交通事故的，他方无责任。
